Lazer Mikrodiseksiyon Tekniği İle Yaralanan Periferik Duyusal Nöronlar Üzerinde Nörotrofin-3 ve Nörotrofin-4/5’in Rejeneratif Etkilerinin Değerlendirilmesi

Authors : Ramazan ÜSTÜN, Elif Kaval OĞUZ

Pages : 84-91

Doi:10.31832/smj.491325

View : 12 | Download : 7

Publication Date : 2019-03-20

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç:  Nörotrofin ailesinin önemli üyelerinden NT3 ve NT4/5’in, mikroskop kontrollü lazer mikrodiseksiyon tekniğiyle akson kesisi insert ignore into journalissuearticles values(aksotomi); oluşturulmuş dorsal kök gangliyon insert ignore into journalissuearticles values(DRG); nöronlarının hayatta kalma kabiliyetini etkileyip etkilemediğini araştırmak.  Gereç ve Yöntem:  Çalışmada 6-12 haftalık Balb/C ırkı fareler kullanıldı. Aseptik koşullarda DRG’ler çıkartıldı, primer DRG nöron kültürü hazırlandı. Hücre ekiminden 48 saat sonra kültürler, NT3 insert ignore into journalissuearticles values( 50 ng/ml); , NT4/5 insert ignore into journalissuearticles values( 50 ng/ml); ve NT3-NT4/5 kombinasyonu ile muamele edildi. Nöritler gövdeden 200 µm uzaklıkta laser mikrodiseksiyon mikroskop sisteminde lazer ışını ile aksotomi edildi. Nöronların ölü-canlı ayrımı için propidyum iyodür insert ignore into journalissuearticles values(PI); alım testi uygulandı.  Nöronlar zaman aralıklı floresan mikroskobik görüntüleme sistemi ile görüntülendi. Bulgular:  PI, ölü hücrelerin çekirdeğini floresan mikroskobu altında parlak kırmızı gösterdi. Tüm deney grupları, kontrol grubuna göre 24.ve 48. saatlerde aksotomi edilen nöronların hayatta kalma oranlarında önemli artış gerçekleştirdi. En fazla hayatta kalma oranının NT3+NT4 grubunda, sonra sırasıyla NT3, NT4 ve kontrol gruplarında olduğu belirlendi. Hayatta kalma oranları 48. saatte 24. saate göre azalma gösterse de bu azalma istatistiksel olarak önemsizdi. Sonuç:  NT3-NT4/5 kombinasyonu, NT3 insert ignore into journalissuearticles values( 50 ng/ml); ve NT4/5 insert ignore into journalissuearticles values( 50 ng/ml); ,  in vitro aksotomi hasarı modelinde yaralı DRG nöronlarının hayatta kalma oranlarını artırmaktadır. Bu nörotrofik faktörler  periferik sinirlerin mekanik yaralanmalarında terapötik potansiyel taşımaktadır. 
Keywords : DRG, nöron, aksotomi, NT3, NT4 5