Purification and Partial Characterisation of Catalase from Chicken Liver and the Inhibition Effects of Some Chemicals on the Enzyme Activity

Authors : Tülin AYDEMİR, Kevser KURU, Seda ÇINAR

Pages : 63-74

View : 15 | Download : 5

Publication Date : 2003-12-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Katalaz, kısmi indirgenmiş oksijen türleri ve H2O2 nin yükseltgen etkisinden dokuların korunmasında önemli rol oynar. Tavuk karaciğer katalazı, insert ignore into journalissuearticles values(NH4);2SO4 çöktürmesi, etonol-kloroform muamelesi, CM-Selükoz ve Sephadeks G-200 kromotografisi kullanılarak saflaştırıldı. Jel filitrasyon kromotografisi ile tavuk karaciğer katalazının molekül ağırlığı yaklaşık olarak 235000 Da bulundu. SDS-jel elektroforezi sonucu tavuk karaciğer katalazının molekül ağırlığı 57500 Da olarak bulundu ve 4 alt birimden oluştuğu tespit edildi. Spesifik aktivite 55765.5 U/mg olarak saptandı. Hem içeriğinin kabaca ölçülmesini sağlayan A407/A270 oranı 0.52 olarak bulundu. Enzim için Km değeri 100 mM olarak belirlendi. Enzimin 7.0-10.0 aralığında geniş bir pH optimumuna sahip olduğu görüldü. Tavuk karaciğer katalaz enziminin optimum sıcaklığı 25 °C olarak tespit edildi. Saflaştırılmış enzim aktivitesi KCN, NaN3, β-merkaptoetanol, DTT, iyodoasetamit tarafından inhibe edildi, fakat sodyum dietilditiyokarbamatın enzimi inhibe etmediği görüldü.
Keywords : Karaciğer, katalaz, purifikasyon