Pankreatik Duktal Adenokarsinoma Hücrelerinde miR-196a’nın, Otofajinin Kontrolü Üzerindeki Rolü ve Terapötik Etkinliği

Authors : Hafize SÖNMEZ, Oğuz ÖZTÜRK, Nilgün GÜRBÜZ

Pages : 450-459

Doi:10.22312/sdusbed.809466

View : 17 | Download : 9

Publication Date : 2020-12-31

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç: Pankreas kanseri, geç dönemde tanı konulması ve yüksek metastatik potansiyele sahip olması nedeniyle en agrasif ve en ölümcül kanserlerin başında yer almaktadır. Fizyolojik şartlarda bir hücre ölüm mekanizması olarak tanımlanan otofaji, aslında tersine kanserde canlılığın devamı için gerekli major mekanizmadır. Bu nedenle, metastatik aşamadaki kanserin tedavisi için otofaji inhibe edilmelidir. Bu da ancak otofajinin kontrolünde rol oynayan üst mediyatörlerin tanımlanması ile sağlanabilecektir. Çalışmamızda, onkojenik etkiye sahip olan miR-196a’nın rolünün ve takibinde baskılanmasının, otofajinin inhibisyonu üzerinden pankreas kanseri hücrelerinde olası terapötik etkilerinin incelenmesi amaçlanmıştır. Materyal-Metot: Pankreatik duktal adenokarsinoma insert ignore into journalissuearticles values(PDAC); hücreleri olan Panc-1 ve MiaPaCa-2’nin negatif-miR veya miR-196a inhibitör ile transfeksiyonu sonrasında; hücre canlılığı ve otofajinin önemli mediyatörlerinden olan Beklin-1, Atg5 ve Atg12’nin mRNA ve protein ekspresyonları sırasıyla MTS, RT-PCR ve western blot yöntemleri ile değerlendirilmiştir. Bulgular: Sonuçlarımız; miR-196a’nın, PDAC hücrelerinin canlılığı ile ilişkili olduğunu ve miR-196a inhibisyonunun herhangi bir hücresel toksik etki oluşturmadan PDAC hücrelerinin canlılığını anlamlı düzeyde azalttığını göstermiştir. Ayrıca miR-196a inhibitör uygulamasının, özellikle Panc-1’da Beklin-1 ve Atg5 gen ekspresyonunu önemli düzeyde inhibe ettiğini, ayrıca tersine MiaPaCa-2’de Atg5 ve Atg12 protein ekspresyonunu arttırdığını göstermiştir. Panc-1 ve MiaPaCa-2 hücrelerinde miR-196a uygulamaları Beklin-1 protein ekspresyonları üzerinde önemli bir etki yaratmamış ve hücreler arasında bir farklılığa yol açmamıştır. Atg5 protein ekspresyonu ise MiaPaCa-2 hücrelerinde daha yüksek bulunmuştur. Sonuç: miR-196 inhibisyonunun, ileri evre Panc-1 hücresinde otofajiyi inhibe, metastatik özellikleri tanımlanmamış olan MiaPaCa-2’de ise otofajiyi uyardığını saptamış bulunuyoruz. Dolayısıyla miR-196a inhibitör tedavisi yaklaşımı, kanserde kontrolü bozulan otofajiyi düzenleyerek PDAC hücrelerinin proliferasyonu azaltmaktadır.
Keywords : miRNA, miR196a, pankreas kanseri, otofaji