Investigating The GMO Existence in Chips and Breakfast Cereals Marketed in Turkey

Authors : Şebnem MUTLU, Osman ŞİMŞEK, Ömer ÖKSÜZ

Pages : 375-385

Doi:10.33462/jotaf.670008

View : 14 | Download : 10

Publication Date : 2021-09-07

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada piyasada satılan mısır ya da mısır ürünleri insert ignore into journalissuearticles values(mısır irmiği, mısır unu vb.); veya soya içeren işlenmiş veya yarı işlenmiş ürünler rastgele seçilerek toplamda 25 adet üründe insert ignore into journalissuearticles values(cips, çerez, gevrek, kuruyemiş kaplaması, un); GDO varlığı DNA temelli bir tespit metodu olan konvansiyonel Polimeraz Zincir Reaksiyonu insert ignore into journalissuearticles values(PCR); ile araştırılmıştır. Bu amaçla homojenize edilen örneklerde CTAB insert ignore into journalissuearticles values(Cetyl Trimethyl Ammonium Bromide); yöntemi ve Roche High Pure DNA Isolation Kit ile DNA izole edilerek çoğaltılması denenmiştir. DNA Isolation Kit kullanılarak DNA izole edilmesi yöntemi daha başarılı olduğundan işlemler bu yöntemle tamamlanmıştır. DNA izolasyonunun ardından Lektin geni, Zein geni, 35S Promotör ve NOS Terminatör bölgelerinin tespiti konvansiyonel PCR ile yapılmıştır. Zein geni tespiti örneklerdeki mısır varlığını, Lektin geni tespiti ise örneklerdeki soya varlığını araştırmak ve kanıtlamak amacıyla yapılmıştır. Zein ve Lektin genleri tespiti için sırasıyla GMO3/GMO4 ve Zein3/Zein4 primer çiftleri kullanılmıştır. Elde edilen DNA’ların amplifikasyonundan sonra DNA agaroz jel elektroforezi ile gözlemlenmiştir. Agaroz jel elektroforezi sonucu alınan görüntülerde 17 örnekte Lektin ya da Zein geni tespit edilirken 8 örnekte bu genler tespit edilememiştir. Lektin ya da Zein geni tespit edilen ürünlerin 35S Promotör ve NOS Terminatör taraması için çalışılmaya devam edilmiştir. Bunun için sırasıyla 35S-3/35S-6 ve tNOS2F/tNOS2R primer çiftleri kullanılmıştır. Mümkün kontaminasyonları gözlemlemek için sterilize su kullanılırken, negatif kontrol amacıyla 0 % Bt-11 ve 0% GTS 40-3-2, pozitif kontrol amacıyla ise 5% Bt-11 ve 10% GTS-40-3-2 kullanılmıştır. 25 örneğin hiçbirinde istenen kalitede ve yeterli miktarda DNA elde edilememesinin sebebinin işleme sırasında uygulanan prosesler insert ignore into journalissuearticles values(kızartma, kavurma, ekstrude etme, basınç vb.); olduğu düşünülmektedir. Hiçbir numunede 35S Promotör ve NOS Terminatör bölgesine rastlanmamıştır.
Keywords : GDO, Konvansiyonel PCR, Lektin geni, Zein geni, 35S Promotör, NOS Terminatör