Effect of Freeze-Drying Extenders on Ram Sperm DNA Integrity

Authors : Burcu ÜSTÜNER, Sema BİRLER, Berrin ZIK, Selim ALÇAY, Gül BAKIRER ÖZTÜRK, Sabire GULER, Hakan SAĞIRKAYA, Zekariya NUR, Serhat PABUCCUOĞLU

Pages : 25-30

View : 17 | Download : 8

Publication Date : 2021-08-19

Article Type : Research Paper

Abstract :DNA hasarının belirlenebilmesi, sperma saklama yöntemlerinin geliştirilmesi açısından önemlidir. Biz çalışmamızda farklı liyofilizasyon medyumları kullanılarak saklanan sperm hücrelerinin DNA bütünlüğünün değerlendirilmesinde akridin oranj insert ignore into journalissuearticles values(AO); ve therminal deoxynucleotidyl transferase-medited dUDP nick and labelling insert ignore into journalissuearticles values(TUNEL); florasan boyama yöntemlerini kullandık. Koçlardan alınan sperma dört gruba bölündü ve her bir grup: I); %10 fötal buzağı serumu insert ignore into journalissuearticles values(FCS); içeren TCM 199 solüsyonu II); %10 FCS ve 0.2 mol/L trehaloz içeren TCM 199 solüsyonu III); 50 mmol/L NaCl ve EGTA [Ethylen glycol-bis insert ignore into journalissuearticles values(β-aminoethyl ether);-N, N, N, N,-tetraacetic acid] 10 mmol/L Tris solüsyonu ve IV); %20 yumurta sarısı ve %7 gliserol içeren Tris bazlı solüsyonlardan biri ile konsantrasyonu 10 x 106 spermatozoa/100 μL olacak şekilde sulandırıldı. Taze alınan spermada DNA fragmentasyon oranı AO ve TUNEL yöntemlerinde sırasıyla %2 ve %4 olarak tespit edildi insert ignore into journalissuearticles values(P>0.05);. AO ve TUNEL yöntemiyle değerlendirilen liyofilizasyon sonrası DNA bütünlüğüne sahip spermatozoa oranlarının, sulandırıcı farklılığına göre etkilenmediği tespit edildi insert ignore into journalissuearticles values(P>0.05);. Aynı şekilde her iki boyama yöntemi karşılaştırıldığında, liyofilizasyon sonrası elde edilen DNA bütünlüğünün değerlendirilmesinde AO ve TUNEL sonuçlarının istatistiksel olarak farklı olmadığı belirlendi insert ignore into journalissuearticles values(P>0.05);.
Keywords : koç sperması, liyofilizasyon, DNA bütünlüğü, TUNEL, AO