Doğal Ortamlardan İzole Edilen Alkalifilik Toprak Bakterilerinde Plasmid Kodlu Na-Tellurit Dirençliliği Ve Transformasyon Olanaklarının Araştırılması

Authors : Hurrem AKKOYUN, Nursel DOSTBİL

Pages : 47-52

View : 12 | Download : 8

Publication Date : 2012-04-25

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada Na-tellurit bileşiğinin toprak bakterilerinden alkalifilik Bacillus spp. suşlarında inhibitör etkisi araştırıldı. Bakteriler, Na-tellurit bileşiğine karşı 1-180 μg/ml artan konsantrasyonlarda denendi. Na-tellurit bileşiğinin 1-60 μg/ml konsantrasyonlardaki denemesinde izolatların çoğunluğunun ürediği gözlendi. 70-180 μg/ml olarak denenen konsantrasyonlarda ise hassasiyet profilinin arttığı saptandı. 180 μg/ml konsantrasyonlarda ise % 100 hassasiyet gözlendi. Ayrıca, izolatlar için MICs değeri 0.8 μg/ml olarak belirlendi. İzolatların Na-tellurit bileşiğine karşı plasmid kodlu dirençliliğinin saptanması için acridine orange (20 μg/ml) ve ethidium bromid (10-5 M) ile plasmid eliminasyonu yapıldı. İzolatlar’da Bacillus spp.’ye ait % 60.86 Na-tellurit bileşiğine hassasiyet, % 39.13 dirençlilik fenomeni ve % 21.10 oranında da plasmid kodlu Na-tellurit dirençliliği bulundu. Na-tellurit bileşiğine ve antibiyotiğe karşı dirençlilik genini taşıyan plasmidler (B. cereus T112-Na-TeR), Na-tellurit bileşiğine ve antibiyotiğe hassasiyet gösteren suşa (B. megaterium DSM 32-Na-TeS) protoplast transformasyonu yoluyla aktarıldı ve 108 transformant elde edildi. Agaroz jel elektroforez seperasyonu sonucunda plasmidin 22.514 bp moleküler ağırlığa sahip olduğu saptandı.
Keywords : Alkalifilik Bacillus spp, Na tellurite, Plasmid, Protoplast transformasyonu