A Chemiluminescence Based Optical Biosensor Coupled with Immunomagnetic Separation for the Detection of ββ-Glucuronidase from Escherichia coli βββ-Glucuronidase from βββ-Glucuronidase from

Authors : Şeref TAĞI, Arthur G RAND

Pages : 75-84

View : 9 | Download : 6

Publication Date : 2016-06-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu araştırmada Escherichia coli glukorunidaz GUS enziminin saptanması amacıyla immunomanyetik ayırma ve kemiluminesans yöntemlerini esas alan biyosensör geliştirilmiştir. Biyosensörde, ucunda odaklayıcı bir mıknatıs bulunan ve tüp biçiminde camdan yapılmış ışık dalga iletim kılavuzu kullanılmıştır. Kemiluminesans tepkime ürünleri paramanyetik kürecikler üzerinde antikorlar tarafından yakalanan GUS enziminin çevresine yoğunlaşmak yerine reaksiyon çözeltisine dağılmıştır. Bu nedenle manyetik odaklama yöntemiyle saptanan kemiluminesans sinyali manyetik odaklama olmadan saptanan sinyale göre daha düşük olmuştur. Ayrıca mikrokuyucuk içerisinde de kemiluminesans yöntemi uygulanmıştır. Logaritmik GUS konsantrasyonu ile logaritmik kemiluminesans ölçüm değerleri arasında doğrusal bir ilişki olduğu görülmüş, mikrokuyucuk ve manyetik odaklama yöntemlerinin duyarlılığı sırasıyla 100 ve 1000 pg GUS/mL olarak saptanmıştır. Mikrokuyucuk yönteminin daha fazla geliştirilme potansiyeli olduğu anlaşılmaktadır. Yöntem basit ve hızlı olup tüm işlemler 70 dakika sürmektedir
Keywords : Glukuronidaz, Kemiluminesans, Biyosensör, İmmünomanyetik ayırma, Manyetik odaklama