Comparison of Cellular Autofluorescence Patterns of Two Model Microalgae by Flow Cytometry

Authors : Uğur UZUNER

Pages : 159-165

Doi:10.18466/cbayarfbe.827615

View : 23 | Download : 7

Publication Date : 2021-06-28

Article Type : Research Paper

Abstract :Mikroalgler, biyoteknolojik araştırmalarda, özellikle antioksidanlar, sekonder metabolitler, pigmentler, karbohidratlar, proteinler ve lipitler gibi biyokimyasal bileşiklerin üretilmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Hem deneysel hem de üretim süreçlerinde mikroalglerin değerlendirilmesinde kullanılabilecek çeşitli yöntemlere ihtiyaç duyulmaktadır. Bu yöntemlerden biri olarak akım sitometrisi, mikroalg hücrelerinde nötral ve polar lipit miktarlarının kantifikasyonu ve hücresel morfolojinin saptanmasında kullanılan avantajlı bir seçenektir. Analiz sürecinde etiketleme protokolünü planlamak için hücrelerin otofloresan özelliklerinin hesaba katılması büyük önem taşır. Çünkü otofloresan miktarı, spesifik olarak işaretlenen protein veya lipitlerin floresan sinyali ile çakışabileceğinden, bu moleküllerin tespitini engelleyebilir. Bu durum, hücreler içindeki etiketli bileşiklerin miktarının yanlış anlaşılmasına neden olabilmektedir. Bu çalışmada, endüstriyel önemdeki iki tatlı su mikroalg ümodeli Chlamydomonas reinhardtii (CC-124) ve Chlorella vulgaris’in (CV-898) otofloresan özellikleri akım sitometrisi ölçümleri üzerinden incelenmiştir. Deneysel bulgular, floresan kanal-2'nin, hem (FL2-H) CC-124 hem de CV-898 mikroalg suşlarının minimum otofloresanını elde etmek için en uygun kanal olduğunu göstermiştir. Elde edilen sonuçlar ayrıca florofora karar verirken biyolojik ürünlerin akış sitometrisine dayalı tespiti sırasında CC-124 ve CV-898 hücre hatlarındaki otofloresans sinyallerine dikkat edilmesi gerektiğini ileri sürdü.
Keywords : autofluorescence, cellular morphology, flow cytometry, microalgae