Tavuk Hastalıklarının Teşhisinde Kullanılan İmmunofloresans Tekniği İçin Konjugeyt Hazırlanması

Authors : Ragıp BAYRAKTAR, Lale BAYRAKTAR, Mehmet DAGISTAN, Osman D. ALAY

Pages : 139-148

View : 12 | Download : 5

Publication Date : 1997-12-01

Article Type : Research Paper

Abstract :İmmunfloresan veya floresan antikor metodu (IF) antijenleri identifiye etmek antijenlerin yerini tayin etmek antikor tayin etmek ve mikroskop altına görünür hale getirmek için işaretlenmiş antikor veya antijenlere uygulanan bir tekniktir. işaretli antikorların kendi antijenine bağlanması, spestifik bir antijen-antikor reaksiyonudur. IF tekniği, bir immunolojik reaksiyonun hassasiyet özelliğini mikroskop doğruluğu ile birleştirir ( 1 5). Antijen-antikor bağlanmaları immunfloresan tekniğinde değişik metodlarla yapılabilir. Direkt ve indirekt teknikleri özellikle ve hassasiyet ve yönünden karşılaştırıldıklarında, floresan madde ile işaretli antiserumla yapılan direkt teknikleri, anti inmmnoglobulin kullanarak yapılan tekniklerden 2 kat daha az hassas olduğu ortaya konulmuştur (4). IF metodu ilk defa Coons ve arkadaşları tarafından 1942 yılında bulunmuş ( 13) ve daha sonra geliştirilerek geçtiğimiz yıllarda ve günümüzde yaygın olarak mikrobiyoloji, viroloji, immunoloji ve biyoloji alanlarında kullanılmaktadır. Şimdiye kadar ülkemizde özellikle tavuk hastalıklarının teşhisinde kullanımı, tekniğin ikinci safhasında kullanılan konjugeytin bulunmaması ve üretilmemesi yüzünden sınırlı kalmıştır. Keza bu tür reagentleri üreten şirketlerde az sayıdadır. Bu çalışmada tavuk hastalıklarının indirekt floresan antikor tekniği ile teşhis edilmesi amacıyla konjugeyt üretimi yapılmıştır. Ülkemizde tavuk hastalıklarının teşhisi ve araştım1a çalışmalarında dışarıdan oldukça zor temin edilerek kullanılan konjugeytin üretilmesiyle bu test daha yaygın bir şekilde kullanılacaktır. Bu araştım1ada tavşan antitavuk iımnunoglobulinin floresan izotiyosiyanat ile işaretlenme metodu çalışılmıştır. Çalışma ayrıca; tavuk lg G elde edilmesini, anti-antikor üretecek tavşanların immunizasyonunu tavşan anti-tavuk IgG elde edilmesini, FITC ile işaretlenmesi tekniklerini kapsamaktadır. Tavuk Hastalıklannda İmınunofloresans-BAYRAKTAR-BAYRAKTAR-DAGISTAN-ALAY
Keywords : Iımnunofloresan, IF, FAT, Tavuk, IgG, Tavşan anti tavuk IgG, FITC, Antikor Tayini, Antijen Tayini, Ragıp BAYRAKTAR, Lale BAYRAKTAR, Mehmet DAĞISTAN, Osman D ALAY, 1997, Etlik Veteriner Mİkrobiyoloji Dergisi