Koyun pulmoner kalp kapakçıklarının hücresizleştirilmesi sonrası preklinik çalışmalar için in vitro olarak yeniden hücrelendirilmesi ve karakterizasyonu

Authors : Müslüm Süleyman İnal, Cihan Darcan, Ali Akpek

Pages : 515-528

Doi:10.17341/gazimmfd.1259974

View : 46 | Download : 40

Publication Date : 2024-08-16

Article Type : Research Paper

Abstract :Doku mühendisliğinde hücresizleştirilmiş greftler umut verici sonuçlar göstermiştir. Hücresizleştirmenin amacı immünojenik bileşenlerin olmadığı, doğal doku mimarisine sahip ve yeniden hücreselliği sağlayabilecek bir iskele oluşturmaktır. Çalışmamızın amacı, hücresizleştirilmiş genç koyunların pulmoner kalp kapakçıkları üzerinde HUVEC ve insan dermal fibroblast hücrelerinin kokültürü ile birlikte canlı/rejeneratif bir kapak elde etmek ve ardından klinik çalışmalara uygunluğunu belirlemek için in vitro karakterizasyonlarını gerçekleştirmektir. Deterjan tabanlı metodla hücresizleştirilen koyun pulmoner kalp kapakçıklarına çeşitli karakterizasyon testleri uygulanmıştır. HUVEC ve dermal fibroblast hücreleri iskele üzerine ekildi ve canlılıkları MTT analiziyle, adezyonu SEM ile, hücre sızması histolojik boyama ile belirlendi. Son olarak elde edilen canlı kapağın rejeneratif kabiliyetini belirlemek için kollajen tipI (Col1), kollajen tipIII (Col3), elastin (Eln) gen ifadeleri PCR ile analiz edildi. Sonuçlar, hücre çoğalmasının iskele üzerinde gün geçtikçe arttığını göstermiştir. Histolojik bulgularda özellikle arter duvarı örneklerinde yeniden hücreselliğin neredeyse tamamen sağlandığı gözlenmiştir. PCR bulgularına göre arter duvarı örneklerinde Col1, Col3 ve Eln gen ifadelerinde önemli bir artış gözlenmiştir. Bu çalışma ile birlikte literatürde ilk defa hücresizleştirilmiş koyun kalp kapakçıkları üzerinde farklılaşmış insan hücrelerinin rejenerasyon potansiyeli olduğu gözlenmiş ve yeni ECM üretimi ile ilgili belirteçler analiz edilmiştir. Sonuç olarak genç koyunların hücresizleştirilmiş kalp kapakçıklarının, doku mühendisliği çalışmalarında başlangıç matrisi olarak kullanılabileceğini, klinik araştırmalara ihtiyaç olduğunu öneriyoruz.
Keywords : Doku Mühendisliği, , pulmoner kapakçık, hücresizleştirme, ksenograft, rejenerasyon, biyomateryal