Termofilik Anoxybacillus gonensis glukoz izomerazının DEAE-Sefaroz üzerine iyonik ve kovalent immobilizasyonu

Authors : Züleyha AKPINAR, Merve KIZAKLI YILDIRIM, Hakan KARAOĞLU

Pages : 793-802

Doi:10.17714/gumusfenbil.1028883

View : 18 | Download : 6

Publication Date : 2022-07-15

Article Type : Research Paper

Abstract :Bir şekerin diğerine (glukozun fruktoza) dönüştürülmesiyle üretilen yüksek fruktozlu mısır şurubu (HFCS), pazarlama değerine sahiptir. Bu nedenle günümüze kadar farklı kaynaklardan (makro ve mikroorganizmalar) izole edilen farklı glukoz izomerazlar [(GI) (D-ksiloz ketol izomeraz, EC 5.3.1.5)] araştırılmıştır. Ayrıca endüstriyel uygulamalar için GI üretiminin maliyetinin düşürülmesi araştırılmış ve bunun için farklı teknikler uygulanmıştır. Enzim immobilizasyon yaklaşımları, enzimlerin tekrar tekrar kullanılmasına izin verdiği için öne çıkan özelliklere sahiptir. Bu çalışmada Anoxybacillus gönensis G2T (AgoGI) yabani tip enzimlerinin DEAE-sefaroz matriksi üzerinde immobilizasyonu (iyonik ve kovalent) gerçekleştirildi. Çalışmanın bir sonraki aşamasında elde edilen enzimlerin kinetik ve biyokimyasal özellikleri belirlendi. İmmobilize enzimler için optimum sıcaklık ve pH değerleri sırasıyla 85 °C ve 6.50 olarak belirlendi. DEAE-sefaroz üzerinde iyonik bağlı AgoGI'nin kinetik verileri (Vmax ve Km) 4.85±2.09 μmol/dk/mg protein ve 130,57±5,42 mM, aynı matris üzerinde kovalent immobilize AgoGI 40.51± 0.81 μmol/dk/mg protein ve 127,28±2,96 mM’dır. Sonuç olarak, DEAE-sefarozun hem kovalent hem iyonik immobilizasyon için immobilizasyon matriksi olarak kullanılması, glukoz izomerazın biyokimyasal ve kinetik parametreleri üzerinde herhangi bir olumsuz etki göstermedi. Bu nedenle, DEAE-sefaroz üzerinde immobilize edilmiş AgoGI HFCS üretimi için mükemmel ve umut verici bir araçtır.
Keywords : Anoxybacillus gönensis, DEAE sefaroz, Glukoz izomeraz, HFCS, İmmobilizasyon