Simultaneous Determination of Acyclovir, Metoprolol and Phenol Red by a RP-HPLC Method for Intestinal Perfusion Studies

Authors : Müge ATEŞ, Mustafa Sinan KAYNAK, Selma ŞAHİN

Pages : 146-161

View : 18 | Download : 7

Publication Date : 2015-06-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Barsak perfüzyon tekniği, bir ilacın barsaklardan permeabilitesini tayin etmek amacıyla en çok kullanılan tekniklerden biridir. Perfüzyon çalışmalarında incelenen maddenin bu çalışmada asiklovir permeabilite katsayısını değerlendirmek amacıyla metoprolol ve fenol kırmızısı referans maddeler olarak sıklıkla kullanılır. Bu çalışmanın amacı, barsak perfüzyonu çalışmalarında kullanılmak için asiklovir, metoprolol ve fenol kırmızısının eş zamanlı olarak tayin edileceği bir ters faz sıvı kromatografisi yöntemi geliştirmek ve valide etmektir. Analiz bir C18 kolonunda 4.6 mm x 250 mm, 5 μm metanol: 0.0125 M potasyum dihidrojen fosfat tampon 55:45, h/h; pH 7.0 ’ dan oluşan mobil faz kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Yöntem FDA kılavuzuna göre seçicilik, duyarlılık, doğrusallık, kesinlik, doğruluk ve stabilite için valide edilmiştir. Tüm kalibrasyon eğrileri doğrusaldır r2> 0.999 . Kantitatif olarak tayin edilebilir en küçük değer asiklovir için 0.04 μg/mL, metoprolol için 0.02 μg/mL, fenol kırmızısı için 0.01 μg/mL’dir. Saptayabilme sınırı asiklovir için 0.01 μg/mL, metoprolol için 0.002 μg/mL, fenol kırmızısı için 0.003 μg/mL’dir. Kesinlik ve doğruluk sonuçları talep edilen sınırları karşılamıştır. Yeni geliştirilen ve valide edilen bu yöntem in situ barsak permeabilite deneylerinde rutin olarak kolayca kullanılabilir.
Keywords : Asiklovir, metoprolol, fenol kırmızısı, HPLC, in situ barsak perfüzyonu