Determination of Gelatinase gelE Expression Levels of Enterococcus faecalis in Mono and Dual Species Biofi lms

Authors : Didem KART

Pages : 162-173

View : 15 | Download : 6

Publication Date : 2015-06-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Biyofilmler insan hayatını tehdit eden önemli bir problemdir. Son yıllarda, persistan enfeksiyonlara yol açan biyofilmlerin çoğunun polimikrobiyal olduğu gösterilmiştir. Enterococcus faecalis idrar yolu, yara enfeksiyonları vb. gibi hastane enfeksiyonlarından sıklıkla izole edilen fırsatçı bir patojendir. E.faecalis’in bazı virulans faktörlerinin ekspresyon seviyelerinde, biyofilm oluşturabilen ve oluşturamayan izolatları arasında farklılıklar gözlenmiştir. Jelatinaz, jelatini, kollajeni ve kazeini hidrolize eden metallo-proteaz enzimi olup, E.faecalis’in virulans faktörlerinden birisidir. Mutant suşlar kullanılarak yapılan bazı çalışmalarda bu enzimin biyofilm oluşumundaki rolü bulunmuştur. İlk amacımız, 11 E.faecalis idrar izolatının biyofilm oluşturabilme prevalansını belirlemektir. İkinci amacımız, tekrar edilebilirliği yüksek iki farklı mikrobiyal türden oluşan biyofilm modelini in vitro ortamda geliştirmek ve C.albicans’ın ortamdaki varlığının E.faecalis’in gelE gen ekspresyonu üzerindeki etkisinin kantitatif RT-PCR ile belirleyebilmektir. Çalışmamızda, test edilen her iki yöntemde de tüm izolatların biyofilm oluşturabildiği saptanmıştır. Ayrıca, E.faecalis ATCC 29212 suşu tarafından oluşturulan monomikrobiyal biyofilm modeline oranla, C.albicans ATCC 90028 ve E.faecalis ATCC 29212 tarafından oluşturulan ikili biyofilm modelinde gelE ekspresyon artışı olduğu sonuçlarımızda gösterilmiştir. İki türden oluşan biyofilm modelinde gözlenen bu gelE ekspresyon seviyesindeki artışı desteklemek amacıyla klinik izolatlar kullanılarak yapılacak çalışmalara ihtiyaç duyulmaktadır.
Keywords : Biyofilm, E faecalis, Jelatinaz geni, Polimikrobiyal, Ekspresyon