Macroautophagy-Lysosomal System Mals in Gaucher Patients Carrying L444P and N370S Mutations

Authors : İncilay (sinici) LAY

Pages : 59-74

View : 17 | Download : 8

Publication Date : 2013-01-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Gaucher hastalığı, lizozomal bir enzim olan glukoserebrosidazın EC 3.2.1.45 aktivitesinin bozukluğu sonucu ortaya çıkar. Lizozomlara hücre dışından endositoz ve fagositoz ve hücre içinden makrootofaji-lizozomal sistem makromoleküller taşınmaktadır. Bu çalışmada, Gaucher hastalığında biriken glukozilseramid ve glukozilsfingozinin normal otofajik füzyon süreci ve/veya otofajik akışı bozabilme ve klinik fenotipi şiddetlendirme olasılığı araştırıldı. Otofaji indüksiyonu ve otofagozomların otolizozomlara bozuk maturasyonu/füzyonu durumunun, otofajik akış otolizozomlara kargonun taşınması bozukluğundan ayırt edilmesi için, en sık gözlenen L444P ve N370S mutasyonlarını taşıyan Gaucher fibroblastlarında LC3B-II düzeyleri ve lizozomlarda floresan DQ-BSA’nın proteolizi Cellomics KSR kullanılarak izlendi. LC3B-I ve GAPDH’a göre artmış düzeydeki LC3B-II, hastaların fibroblastlarında otofagozomların sayısında artışı ve/veya azalmış lizozoma akış hızını gösterdi. Bu durum hasta fenotipleri ile uyumlu bulundu. Hasta fibroblastlarında DQ-BSA’nın düşük proteolizi, Gaucher hastalığında otofajik akış hızının azaldığını göstermektedir. Azalmış lizozoma akış hızı, L444P mutasyonu taşıyan Tip II, akut nöropatik formda daha belirgindi. Sonuç olarak, L444P ve N370S mutasyonlarında otofajik ve LC3B-II’yi de içeren diğer substratların lizozomlara akış hızı azalmıştır ve bu azalma klinik şiddet ile kabaca uyumludur.
Keywords : Makrootofaji lizozomal sistem, Gaucher, LC3B II, DQ BSA