CANLILARDA “TEK HÜCRE JEL ELEKTROFOREZ” YÖNTEMİ İLE DNA HASAR ANALİZİ (TEKNİK NOT): COMET ANALİZ YÖNTEMİ

Authors : Murat DİKİLİTAŞ, Abdurrahim KOÇYİĞİT

Pages : 77-89

View : 21 | Download : 9

Publication Date : 2014-02-21

Article Type : Research Paper

Abstract :Comet analiz yöntemi olarak da bilinen tek hücre jel elektroforez yöntemi son yıllarda genişleyen uygulama alanı, güvenilirliği ve uygulaması kolay olması bakımından kimyasal ve fiziksel etmenlerin canlılar üzerinde yol açtığı genotoksik ve sitotoksik etkilerin bir göstergesi olan DNA hasar seviyelerinin ölçülmesini sağlayan önemli bir metotdur. Bu metot, izole edilen DNA içeren tek hücrelerin DNA’larının lam üzerinde hazırlanan agar jel içerisinde elektroforetik ortamda yürütülmesi ve hasar seviyesine göre göç eden farklı yük ve molekül ağırlıklarına sahip DNA parçalarının DNA spesifik floresan boya ile boyandıktan sonra, floresan mikroskop altında değerlendirilmesi esasına dayanmaktadır. Metot, oksidatif stres, toksik ağır metaller, kimyasal ajanlar, ilaçlar ve ultraviole gibi çeşitli genotoksik ajanların DNA sarmalları üzerinde oluşturduğu tek veya çift zincir kırıklarını doğru, hassas, hızlı, ucuz ve az bir örnek hacmi kullanarak ölçen bir yöntem olup, tüm canlı hücreleri üzerinde yapılan çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır.
Keywords : Alkali Tek Hücre Jel Elektroforezi, Comet Analizi, SCGE, DNA Hasarı, DNA Tamiri