Üçlü Faz Ayrımı (ÜFA) ile Geleneksel Enzim Saflaştırma Tekniğinin Karşılaştırılması; ÜFA ile Saflaştırılan β-Galaktosidazın Termodinamik Özellikleri

Authors : Yonca DUMAN

Pages : 107-117

View : 10 | Download : 7

Publication Date : 2016-09-30

Article Type : Research Paper

Abstract :Enzimlerin yaygın endüstriyel kullanımları mevcuttur. Ancak bu önemli biyokatalizörlerin saflaştırma maliyetleri kullanım alanlarını kısıtlamaktadır. Son yıllarda yapılan çalışmalar enzimlerin saflaştırma basamaklarını düşürerek maliyet ve zaman tasarrufu yapmak yönündedir. Bu amaçla Üçlü faz yöntemi (ÜFA) ile enzim saflaştırması önemli bir yöntemdir. Hedef enzim Üçlü faz yönteminde t-bütanol ve amonyum sülfat ile kullanılarak enzim çözeltisi tuzlu ara fazda çöktürülür. Metodun basitliğinin yanı sıra hızlı sonuç vermesi ve düşük maliyeti endüstriyel kullanımını cazip hale getirmektedir. Bu çalışmada enzimlerin geleneksel yöntemler ile ÜFA saflaştırılma protokolleri karşılaştırılarak yöntemlerin birbiri üzerine üstünlükleri tartışıldı. Aynı zamanda ÜFA Yöntemi ile saflaştırılan β-galaktosidaz enziminin termodinamik özellikleri ve ΔG # , 62.21 kJ mol -1 ; Δ #E-T , -13.56 kJ mol -1 ; Δ #E-S , 0.25 kJ mol -1 ; ΔH # , 26.06 kJ mol -1 ; ΔS # , -0.12 kJ mol -1 K -1 olarak hesaplandı.
Keywords : β Galaktosidaz, saflaştırma, termodinamik özellikler