Alcohol Dehydrogenase from Sheep Liver: Purification, Characterization and Impacts of Some Antibiotics

Authors : Yeliz DEMİR, Bülent ŞENGÜL, Bülent ERGUN, Şükrü BEYDEMİR

Pages : 151-160

View : 20 | Download : 10

Publication Date : 2017-09-30

Article Type : Research Paper

Abstract :Alkol dehidrogenaz (ADH), her bir alt biriminin bir Zn 2+ metal içeren katalitik alana ve bir kofaktör bağlama alanına sahip olduğu dimerik bir enzimdir. Bu enzim, alkolü, aldehide dönüştürür. Bu makale koyun karaciğerinden alkol dehidrogenazın saflaştırılması, karakterizasyonu enzimin aktivitesi üzerine bazı antibiyotiklerin in vitro  ekilerine odaklanmaktadır. ADH, DEAE-Sephadex A-50 iyon değişim kromatografsi ve Sephadex G-100 jel fltrasyon kromatografsi vasıtasıyla koyun karaciğerinden 0.5 U mg -1 protein spesifk aktivite ve yaklaşık olarak 52.03-kat saflaştırıldı. Enzimin alt birim ve doğal hallerinin molekül kütleleri jel fltrasyon kromatografsi ve SDS-PAGE ile sırasıyla 38.16 kDa ve 80.49 kDa olarak belirlendi. ADH’ın optimum iyonik şiddeti, sıcaklığı ve pH’sı sırasıyla 400 mM, 40°C ve 10.5 idi. Antibiyotiklerin inhibitor etkileri çeşitli konsantrasyonlarda denendi. Kanamisin sülfat, amikasin sülfat, gentamisin, linkomisin ve klindamisin için IC 50 değerleri sırasıyla, 43.31, 36.47, 20.38, 18.73 ve 1.31 mM olarak bulundu.
Keywords : Alkol dehidrogenaz, antibiotikler, inhibisyon, karakterizasyon, saflaştırma