Yenilebilir Dört Bitki Türünün Fitokimyasal İçeriğinin Miktarsal Tayini için LC-MS/MS Metot Validasyonu

Authors : Mustafa Abdullah YILMAZ, Oguz ÇAKIR, Enes ARICA, İsmail YENER, Birol OTLUDİL, Mehmet Hakkı ALMA, Abdulselam ERTAŞ

Pages : 179-187

Doi:10.21597/jist.407870

View : 14 | Download : 6

Publication Date : 2018-03-31

Article Type : Research Paper

Abstract :Bitkilerde 8 fitokimyasal bileşiğin (sinarin, kafeik asit, sirinjik asit, p-kumarik asit, o-kumarik asit, vanilik asit, ferulik asit, klorojenik asit) miktarsal tayini için kapsamlı bir LC-MS/MS metodu geliştirildi ve validasyon çalışmaları yapıldı. Geliştirilen analitik metot lineerite, gerçeklik (geri kazanım), gün içi ve günlerarası kesinlik (tekrarlanabilirlik ve tekrar üretilebilirlik), tespit ve tayin limitleri (LOD/LOQ) ve bağıl standart belirsizlik (% 95 güven aralığında (k=2)) gibi parametreleri içerek şekilde tam validasyon çalışmaları yapıldı. Kromatografik ayrım ters faz UHPLC sistemi ile yapıldı. Kütle dedeksiyonu ise her analit için negative veya pozitif iyonlaşma modları optimize edilerek üçlü kuadrupol kütle spektrometresi ile gerçekleştirildi. Analitlerin miktarsal tayini için çoklu reaksiyon görüntüleme (MRM) kullanıldı, moleküler iyonlar ve ilgili geçiş iyonları ise optimize edildi. Metot validasyonu sonrası, enginar (Cynara scolymus L.), brokoli (Brassica Oleracea var. Italica), karnabahar (Brassica Oleracea var. Botrytis) ve kenger gibi (Gundelia Tournefortii) bazı yenilebilir bitkilerin methanol ekstrelerinin fitokimyasal içerikleri geliştirilen ve valide edilen LC-MS/MS metodu ile tespit edildi. Analiz edilen bitkiler arasında enginar, açık ara farkla fenolik yönünden en zengini olarak belirlendi. Ek olarak, analiz edilen tüm bitkilerde klorojenik asit en bol bulunan bileşen olarak görüldü. Çalışılan örnekler analiz için seçilmiş bitkiler olsa da, geliştirilen LC-MS/MS metodu bitki dünyasındaki pekçok bitkiye uygulanabilirdir.
Keywords : Fitokimyasal, LC MS MS, metot validasyonu, yenilebilir bitkiler